1）更有可能的原因是樣品組分吸附在色譜柱的前段?？赡苁怯捎跇悠吩诹鲃?dòng)相中的溶解度低而沉淀出來的，也有可能是強(qiáng)吸附，或是樣品本身與填料表面發(fā)生微弱的不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)。樣品溶液本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近，而且進(jìn)樣體積較大（內(nèi)徑4.6mm，上樣體積在50ul以上）對(duì)柱頭端的填料影響比較大，通常這樣的情況伴隨柱壓升高。

解決方法：選擇合適的樣品前處理技術(shù)，去除掉強(qiáng)保留物質(zhì)。使用保護(hù)柱，盡量選擇與分析柱同種填料，同種鍵合方法的保護(hù)柱。如果使用不同品牌的填料、裝填工藝的保護(hù)柱，在分離能力和保護(hù)分析柱方面可能得不到更好的效果。也不要使用更大粒徑的保護(hù)柱，更大粒徑或者裝填較差的保護(hù)柱會(huì)因?yàn)樗姆逭箤捵饔枚鴮?dǎo)致分離能力下降。

2）鍵合相脫落變性。色譜條件多方作用導(dǎo)致壽命短，這是目前的色譜技術(shù)不能解決的，一般情況下小基團(tuán)鍵合相更容易被水解而脫落。流動(dòng)相中鹽濃度越高，越容易引起水解。這種情況下，就只能重新開發(fā)色譜條件。

確定一下使用頻率、沖洗頻率、流動(dòng)相的更換頻率、流動(dòng)相的試劑品牌、純度等是否和之前一樣，如果有更換，那壽命有差異是正?，F(xiàn)象。如果都與之前相當(dāng)，那需要檢查這支色譜柱是否受過劇烈震蕩，比如：不小心摔過，或者運(yùn)輸過程中受過劇烈震蕩，建議與廠家的技術(shù)人員溝通。

這種情況的發(fā)生，很大的原因是，前期建立方法時(shí)，并不是連續(xù)做項(xiàng)目，而是不停地更換流動(dòng)相。這就意味著色譜柱的沖洗頻率比較高，而更換的流動(dòng)相的清潔度也是比較好的。建立方法的時(shí)候很難連續(xù)進(jìn)樣多次，有時(shí)候甚至一周才做一次項(xiàng)目，這樣就會(huì)產(chǎn)生di一支柱子使用時(shí)間更久的錯(cuò)覺。而方法建立后，做方法驗(yàn)證，流動(dòng)相固定下來，就會(huì)一次性配置較大體積的流動(dòng)相，這樣流動(dòng)相較易變質(zhì)，有時(shí)肉眼不能直接分辨。而且會(huì)連續(xù)多次過夜進(jìn)樣，這樣對(duì)色譜柱的沖洗也不是很及時(shí)。這些都是可能導(dǎo)致色譜柱壽命變短的因素。